Nanopartículas de Zeína Carregadas com Ácido Anacárdico: Ação Antimicrobiana In Vitro e Toxicidade Local e Sistêmica In Vivo

Abstract

Introdução: O ácido anacárdico (AA), produto extraído do líquido da castanha de caju, é um promissor agente antimicrobiano, tendo se mostrado efetivo na redução da viabilidade bacteriana de Streptococcus mutans (SM) em culturas planctônicas, porém ainda sem estudos avaliando seu efeito em biofilmes dentários. Objetivo: Avaliar o efeito antiplaca de formulação à base de nanopartículas de zeína carregadas com AA extraído da casca da castanha de caju em biofilmes de SM in vitro e analisar sua toxicidade in vivo. Metodologia: Inicialmente, foi determinada a atividade antibacteriana da formulação com AA através dos testes de concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM). Para análise em biofilme, discos de hidroxiapatita, imediatamente após formação da película adquirida, foram imersos por dois minutos em quatro grupos teste: Grupo 1 - solução hidroetanólica; Grupo 2 - Nanopartícula de zeína + Solução hidroetanólica; Grupo 3 - Nanopartícula de zeína carregada com ácido anacárdico 9,337 μg/mL+ Solução hidroetanólica e Grupo 4 - Digluconato de clorexidina 0,12%. Em seguida, os discos foram imersos em caldo de cultura para formação de biofilme. Após cinco dias de troca de meio, os biofilmes foram coletados para análise da viabilidade bacteriana e peso seco. O grau de toxicidade subcrônica foi obtido através de estudo in vivo (modelo animal), após a administração oral (gavagem) e tópica (os fármacos foram pincelados sobre dorso e ventre de língua, mucosa jugal, palato duro e gengiva) em quatro grupos teste: Grupo Salina – solução salina estéril a 0,9%; Grupo Clorexidina – clorexidina 0,12%; Grupo AA1 – nanopartícula de zeína carregada com AA e Grupo AA2 – nanopartícula de zeína, por um período de 30 dias. Resultados: Foi encontrado o valor de 0,36 μg/mL tanto para a CIM quanto para a CBM. A solução testada no Grupo 3 foi eficaz na inibição da formação do biofilme de SM, pois não foram observadas unidades formadoras de colônia após 5 dias, o que também foi observado no Grupo 4. Após 30 dias de tratamento com os fármacos, os animais dos Grupos AA1 (-4,25±1,49) e AA2 (-4,00±1,30) mostraram maior perda de peso; não havendo diferença significativa na massa dos rins, pulmões, fígado e baço. Os Grupos AA1 (0,16±0,01) e AA2 (0,16±0,02) apresentaram menor massa cardíaca que os animais dos Grupos Salina (0,21±0,01) e Clorexidina (0,22±0,02) (p=0,045). Com relação à toxicidade local, a espessura média do epitélio de ventre lingual no Grupo Salina (3250±439 μm) foi significantemente inferior ao Grupo AA2 (8650±1079 μm) (p=0,001); os Grupos AA1 e AA2 apresentaram espessura média inferior do epitélio de mucosa jugal em relação ao Grupo Clorexidina (p<0,001) e a espessura dos epitélios de gengiva do Grupo Salina (134±13 μm) foi significantemente inferior aos Grupos Clorexidina (15192±4868 μm), AA1 (14171±1852 μm) e AA2 (7316±2507 μm) (p=0,001). Não houve sinais significativos de infiltrado inflamatório. Conclusões: Os resultados denotam valor de CIM e CBM otimizado pela presença de nanopartículas como também potencial efeito anti-placa do AA na formulação testada. A administração sistêmica do AA reduziu, no modelo animal, a massa cardíaca, mas não exibiu sinais de toxicidade macroscópica e histológica.